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猪圆环病毒病是由猪圆环病毒II型(Porcine circovirustype2 PCV2)引起的一种新的传染病。本病主要表现为猪的繁殖障碍,断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic Wasting Syndrome,PMWS),猪皮炎肾病综合征(Porcine deromatitis and nephropathy Syndrome,PDNS),间质性肺炎(interstitial Pneumonia,IP)等。另外,新生仔猪先天性震颤也是由PCV2引起的。迄今本病已在德国、法国、西班牙、加拿大、美国、日本、印度、韩国和中国台湾等地区流行。前几年我国先后从加拿大、美国等国引进种猪,当时口岸检疫未将此病列为检疫对象,因而将圆环病毒病带入国内。
目前我国已有20几个省(市)的大中型集约化猪场,甚至农村的个体养猪户都在流行此病。由于圆环病毒病商品尚未疫苗普遍推广应用,对病毒病又无特效药物,所以很多发病猪场的技术人员都感到束手无策。由于本病引起患猪产生免疫抑制,感染后继发多种病毒和病原菌混合感染,投入大量抗菌药物而无济于事,导致成千头猪的死亡,造成的经济损失十分惨重。
(一)病原
猪圆环病毒是由Tischer等1974年在PK-15细胞中发现的,当时认为是一种细胞污染物,后被证实为一种新病毒。病毒粒子为20面体对称,以滚环方式进行复制,可在PK-15细胞上生长,但不引起细胞病变。由于该病毒的基因组是一种环状、无囊膜、单链DNA,因此在ICTV(International Committee On the Taxonomy of Viruses)发表的第6次病毒分类报告中,将猪圆环病毒(PCV),鸡贫血病毒(CAV),鹦鹉喙羽病毒(PBFDAV)3种病毒设立一个新科,即圆环病毒科,下设一个圆环病毒属。圆环病毒有两种基因型即PCV1和PCV2。前者广泛存在于猪源肾细胞中,但并不引起感染猪发病,后者由A11an等从患PMWS的猪群中分离到。大量研究证实,PCV2是引起圆环病毒病各种病症的病原。
PCV病毒粒子的平均直径17nm,在CsCl中的浮密度为1.33~1.34。它对酸环境(pH3)、氯仿和高温(56℃和70℃)有抵抗作用。PCV能在一些来源于猪的细胞株中复制。在细胞培养中,应用免疫染色技术检测病毒感染的细胞,该病毒不引起明显的细胞病变(CPE)。A11an等(1994)已经证明了PCV来源于猪骨髓、外周血液、肺洗出物和淋巴结的单核细胞/巨噬细胞。McNeilly等(1996)研究了PCV2感染对猪肺巨噬细胞体外免疫功能的影响,PCV2感染后观察到巨噬细胞介导的、分裂素诱导的对淋巴细胞增生有明显的抑制作用,这些结果表明PCV2感染干扰了正常的免疫功能。PCV1基因组大小为1759bp,包含7个阅读框架。PCV2基因组分两种:一种为1767bp,另一种为1768 bp。PCV1和PCV2的核苷酸同源性为68%。而PCV2不同毒株之间序列同源性均在95%以上。
PCV2基因组含有11个阅读框架,即ORF1~ORF11。各阅读框架大小差异悬殊,其中ORF1、ORF5、ORF7、ORF10的5´~3´方面相同;ORF2、ORF3、ORF4、ORF6、ORF8、ORF9、ORF115´~3´方面相同。这些阅读框架表现为重叠基因,从而充分利用了圆环病毒有限的遗传物质,这可能是生物进化过程中自然选择的结果。在11个阅读框架中,对ORF1和ORF2研究较深。PCV2ORF1有945个碱基,编码314个氨基酸,PCV2ORF2有705个碱基,编码234个氨基酸。从氨基酸序列推测,ORF1有3个糖基化位点,ORF2和ORF4各有1个。目前对ORF2的研究已成为PCV2研究的热点。Liu Q等用免疫荧光方法研究了PCV2ORF2在细胞中的定位,发现ORF2蛋白N端41个氨基酸与PCV2在细胞核内定位有关,进一步分析表明,第12个到第18个,第34个至第41个氨基酸域在定位中起着重要作用。
NaWagitgul等研究发现,ORF编码蛋白与PCV复制有关,而ORF2编码一种分子量为30Kda的结构蛋白,用杆状病毒表达ORF2基因,在电镜下能观察到ORF2蛋白可以自我装配成病毒衣壳样颗粒。
Mahe等用杆状病毒和质粒载体表达了ORF1和ORF2,发现PCV1ORF2虽与PCV2ORF2抗原性相关,但只有ORF2蛋白可以被PCV2多抗识别。Liu Q等将ORF2基因连接到MBP-His(8)-tag基因3´端,在细菌中表达了ORF2融合蛋白,该融合蛋白可以与PCV2的多抗反应。这表明可以用ORF2来区分PCV1与PCV2。Truong C等也利用ORF2抗原表位作为PCV2试验猪及自然感染猪血清学检测的标志。由于ORF2的以上特性,使其成为临床上在分子水平上诊断PCV2的理想抗原,因此ORF2必将在PCV2血清学调查中发挥巨大作用。
(二)流行病学
圆环病毒病已在世界范围内广泛传播。根据国外血清学调查资料显示,最早在德国(Tischer等,1982),后来在加拿大(Dulac和Afshar,1989),新西兰(Horner,1991),英国(Eawards和Sands,1994),北爱尔兰(AIIan等,1994)和美国(Hines和Lukert,1995)等国家的猪群中查出抗PCV2抗体。1986年Tischer等已证实,断奶仔猪多系统衰竭综合征在猪群中流行。1991年在加拿大的健康猪场观察到2~8周龄仔猪的新疾病,用抗菌药物没有明显效果,此病到1994年已在该国广泛流行。1995年法国的布列塔尼省约100个猪群的8~13周龄仔猪发生了类似的传染病。1996年美国报道了在印第安纳州和衣阿华州有本病发生。1997年Segales等第一次报道在西班牙中部和东北部的3个猪场有此病暴发。1997年北爱尔兰Kennedy等报道,在1997年10月某场11周龄左右的仔猪发生该病。此后,在意大利、丹麦、荷兰、墨西哥等国家相继报道了猪圆环病毒病。我国相邻的日本于1996年报道了本病,并发现继发感染多种病毒和致病菌。韩国最早于1997年报道了PMWS,并于1999年报道了PDNS。泰国于1998年最早报道了PMWS,而回顾性研究发现,实际上已在1993年就有PCV2感染。
我国的台湾省早在1995年就发现了PMWS,而且成为严重影响台湾养猪业的重要疫病。郎洪武等(2000)用ELISA试验在北京、河北、山东、天津、江西、吉林、河南等7省(市)22个猪场各类猪群血清中均检测出抗PCV2抗体。559份血样的总阳性率为42.9%(240/559);20日龄未断奶仔猪阳性率为O(0/58);1~2月龄仔猪阳性率为16.5%(23/139);后备母猪阳性率为43.3%(61/141);经产母猪阳性率为85.6%(107/125);育肥猪阳性率为51.0%(49/96)。曹胜波等(2001)采用PCR法从河南、江西、湖北和广东等省的疑似病料中检测出PCV2。迄今国内各地大、中型集约化养猪场以及农村小型养猪户普遍流行本病。
关于PCV2的宿主范围,除猪感染之外,Tischer等(1995)应用ELISA和I I F试验检测了人、小鼠和牛血清,结果均查出低水平的抗PCV2抗体,其阳性率分别为30%、12%~69%和35%。以上数据表明,人、小鼠和牛可以感染PCV2,但还有待进一步研究。未能从绵羊、山羊、兔、鸡、火鸡等动物血清中查到抗PCV2抗体。
PCV2的排毒和传播方式:感染PCV2的病猪可以从眼分泌物、鼻腔分泌物和粪便排出病毒,这些病毒颗粒污染猪舍环境,散布到空气中,再经过口腔,呼吸道或皮肤感染侵入猪体。种公猪精液中的病毒可以通过交配传给母猪,怀孕母猪可经过胎盘垂直传给胚胎,使胎儿致死,引起母猪发生流产,产木乃伊胎、死胎及弱仔。仔猪出生时一方面自身带毒,同时再感染环境中的PCV2,从而导致仔猪的多种临床症状。从发病年龄来看,除公、母猪易感染外,仔猪2~12周龄均可感染。断奶仔猪多系统衰竭综合征一般发生于5~12周龄,以7~11周龄多发,据作者在临床实践中发现,90~130日龄的育肥猪仍可感染PCV2。
(三)临床症状
1.公猪:表现厌食,精神沉郁,体温略有升高(40~40.5℃)偶尔出现咳嗽,打喷嚏,随后表现性欲降低,严重者完全没有性欲,丧失配种能力。
2.后备母猪:除精神、食欲改变之外,体温一般升高0.5~1℃,也有不发热的。咳嗽,呼吸次数增加,主要表现发情异常,迟发情或不发情,或配种后不易受孕,出现返情。
3.生产母猪:早期感染的怀孕母猪出现流产,其中有些母猪的胎儿死于腹中,有的发生自溶,即胚胎在子宫内溶解后被吸收,到预产期仍为空腹无分娩表现。怀孕中期感染,胚胎死亡后出现干尸化,分娩时产出木乃伊胎,据作者调查发现,感染PCV2的怀孕母猪以产木乃伊胎为多见。后期感染者产死胎或弱仔,后者不会吃奶或全身震颤(先天性震颤),在数小时或1~2天内死亡。这种母猪一般要推迟或提前3~5天分娩,在分娩前不吃食,精神烦燥不安。产死胎的母猪多表现发情推迟,配种后易发生返情,有的猪场返情率高达70~90%。
4.初生仔猪先天性震颤:现有的研究证实,PCV1和PCV2均可引起初生仔猪发生先天性震颤,主要发生在初产母猪所产的仔猪,发病率在1%~3%。临床表现从轻微的震颤,到肢体、头部或躯干明显地、剧烈地、颤抖的有节律的阵发性痉挛。当仔猪斜卧或睡觉时,震颤可能减轻或暂时消失。震颤可能因为外部刺激,如噪音、受寒或触摸等突然的因素而引起增强。轻微的猪只几天就可以消除震颤,恢复正常,感染严重的仔猪因剧烈震颤而不能吃奶则会饿死,幸存者其震颤可以轻微的形式持续数月,甚至达两年之久。另一种表现是后肢肌肉的强直性痉挛,并伴有尾部的轻微震颤,具有这种症状的患猪两后肢分开,似犬坐姿势,这种患猪可在3周内康复,患猪体温正常。 |