摘要：本文对猪胚胎移植技术的各个操作环节和相关的配套技术进行了系统的试验研究。用PMSG HCG的激素组合，对不同品种的青年母猪做超数排卵处理，稳定地使其排卵数增加一倍；建立了有效的母猪同期发情技术。输卵管采集胚胎的获胚率达到79.9%（超数排卵组）和81.8%（自然发情组），子宫角采集胚胎的采胚率71.9%。胚胎输卵管移植的受孕率达到80.5%，产仔数7.5±1.2头；子宫角移植的受孕率达到83.8%，产仔数7.8±0.9头。提出猪胚胎移植技术在养猪生产中具有广泛的推广价值。

猪胚胎移植试验成功最早于1951年由Kvashickii报道^[1]。到20世纪60年代，已经基本建立了外科手术方法采集和移植胚胎的技术。由于猪生殖道的特殊形态：（1）子宫颈的皱褶较多较深，由子宫颈将冲卵管送入子宫有一定难度；（2）子宫角过长（80～100cm），盘绕过多，容积过大。上述两点使非外科手术采集和移植胚胎相当困难。同时，由于猪繁殖力较高，用胚胎移植技术从少数优良个体获得较多后代的要求不像对牛羊那么迫切，因而制约了胚胎移植技术在养猪生产中的普遍应用。尽管如此，到70年代以后，北美和欧洲也开始将这种基于外科手术的胚胎移植技术应用于向闭锁猪群引进外血和国际间的引种。^{[2] [3] [4]}

本课题组于1989年初步建立了猪胚胎移植技术，当时的主要目的，是出于转基因猪和猪胚胎工程研究工作的需要。以胚胎移植做为基本技术平台，建立了转基因猪技术，先后将六种外源基因导入猪的受精卵，得到了相应整合并表达的转基因猪^[5]；建立了猪卵巢卵母细胞体外成熟和体外授精技术，得到了体外受精胚胎移植的“试管猪” ^[6]；建立了猪胚胎细胞核移植技术，得到了核移植重组胚胎移植的“克隆猪” ^[7]。与此同时，十几年来对猪常规胚胎的移植及相关技术，例如同期发情，超数排卵等也进行了大量的探索和研究，得到了一些试验结果。为胚胎移植技术在养猪生产中的应用奠定了技术基础。

一、 猪的超数排卵

以PMSG HCG的激素组合处理，对影响猪超排效果的主要因素进行了试验研究。^{[8] [9]}

1、不同品种母猪的超排效果

对性成熟后四个品种的青年母猪，PMSG按每公斤体重15IU处理，其超排结果如表1。

表1 不同品种母猪的超数排卵效果

从表1可见，超排处理使青年母猪的排卵数在其原有的基础上提高一倍左右。

2、PMSG用量对超排效果的影响

对青年湖北白猪，按PMSG的不同用量处理，其结果如表2。

表2 PMSG用量对超数排卵效果的影响

同一栏数中具有不相同字母上标示差异显著（P<0.05）

从表2可见，PMSG用量过小，达不到超排效果；用量过大，易引起卵巢囊肿，排卵数减少。

3、发情周期不同时间处理对超排效果的影响

分别对湖北白猪青年母猪在发情周期的11-18d进行等剂量的PMSG HCG处理，结果如表3。

表3 发情周期不同时间超排的效果

PMSG剂量为1000IU，72h后HCG1000IU

结果显示在情期的15～18d处理均收到良好效果，排卵数及超排的有效率均显著高于11～14d处理。

二、母猪的同期发情

在供体做超数排卵处理、注射PMSG的同时，对处于情期13-18天的受体母猪注射PMSG（按每公斤体重I0IU），72小时后，等剂量的注射HCG，其实验结果如表4。

表4 青年母猪同期发情处理结果

由于受体与供体同一天内发情或比供体迟一天发情，其胚胎移植的效果无显著差异，因此，用这种方法选择与供体发情同步的母猪是有效的。也可以选择与供体自然同步发情的母猪做受体。

三、胚胎的采集

根据采集胚胎的部位不同，分为输卵管采胚和子宫角采胚。

统计对青年湖北白猪采胚胎结果如表5。

表5 青年母猪采胚结果表

从表5可见：（1）输卵管采胚的获胚率明显高于子宫角；（2）输卵管采胚，超数排卵组和自然发情组的获胚率无显著差异；但超排组每头母猪比自然发情组多获胚8.2头；（3）就输卵管采胚而言，1991～1995年的数据与1998～1999年相比，尽管采胚的基本方法没有实质上的改变，但由于细微技术上的改进以及人员操作的熟练，使采胚率提高了五个百分点。

四、胚胎的移植

根据移植的部位不同，也分为输卵管移植和子宫角移植。

表6 猪鲜胚移植试验结果